인체 켈로이드 피부조직에서 AKR1C3 단백질 발현에 대한 연구 : Expression of Aldo-Keto Reductase 1C3 Protein in Human Keloid Skin Tissue :

남두현

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자료유형: 학위논문

저자정보: 남두현 (순천향대학교, 순천향대학교 대학원)

지도교수: 이영만.

발행연도: 2016

저작권: 순천향대학교 논문은 저작권에 의해 보호받습니다.

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이 논문의 연구 히스토리 (2)

2016

인체 켈로이드 피부조직에서 AKR1C3 단백질 발현에 대한 연구 : Expression of Aldo-Keto Reductase 1C3 Protein in Human Keloid Skin Tissue

남두현 성형외과학 2016.01 학위논문

Expression of AKR1C3 Protein in Human Keloid Skin Tissue

남두현 , 이다운 , 김철한 외 3명 Archives of Aesthetic Plastic Surgery 2016.01 학술저널

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켈로이드는 상처치유과정 중 결체조직이 과다하게 증식하여 발생하게 되는 비정상적인 상처 반응이다. 최근 연구들에서 활성산소(ROS)가 켈로이드 형성에 관여한다는 것이 발표되었다. ROS는 산화 자극으로 인해 유도되며 산화 손상으로 인해 발현된 유전자들의 활동에 의해 촉진된다. Aldo-keto reductase(AKR)는 반응성 카보닐 그룹을 이용하여 파과적인 활성산소의 독성을 해독시키는 역할을 한다. AKR1C3 단백은 AKR 그룹에서 중심이 되는 해독 효소이다. 본 연구에서는 생체 내 켈로이드 피부와 정상 피부에서 AKR1C3의 발현을 비교하는 것을 목적으로 하였다. 광배근 피판을 이용한 유방 재건술을 받은 여자환자들에서 얻은 6개의 정상 피부 표본과 켈로이드 제거 수술을 받은 환자들에서 얻은 6개의 켈로이드 피부 표본을 채취한 후 액화질소를 이용해 즉시 냉동시켜 영하 80C에서 보관하였다. 면역조직화학염색을 이용한 병리학적 확진과 웨스턴블로팅(western blotting)을 이용하여 AKR1C3 단백의 발현을 비교하였다. 켈로이드 피부와 정상 피부 사이 통계학적 유의성을 비교하기 위해 비모수 만-휘트니 U검정을 이용하였다. P값이 0.05 미만시 통계학적으로 유의한 차이를 보인다고 간주하였다. 면역조직화학염색에서 AKR1C3 단백의 발현이 6개의 켈로이드 표본 모두에서 더 약하게 나타났다. 웨스턴블로팅에서 AKR1C3 단백의 발현이 정상 피부에서는 1.92 (SD=0.083) 였고, 켈로이드 피부에서는 0.57 (SD=0.190) 였다. 이는 만-휘트니 U검정을 통해 통계적으로 유의하게 (P<0.05) AKR1C3 단백이 정상 피부보다 켈로이드 피부에서 더 낮게 발현된다는 것을 의미한다. 본 연구에서는 AKR1C3 단백이 정상조직에 비하여 켈로이드 조직에서 의미있게 낮게 발현된다는 것을 확인하였고, 이것이 활성산소의 대사과정 및 인체 내 켈로이드 형성을 조절하는 과정에 관여할 수 있다고 판단하였다. 이것은 AKR1C3 단백이 켈로이드 조직 형성에 영향을 미칠 수 있다는 것을 밝힌 첫 번째 연구이며, 추가적인 연구를 통하여 켈로이드의 기전을 밝히고, 치료법을 연구하는데 도움이 될 것으로 생각한다.

Keloids are abnormal wound responses that are caused by hyperproliferative growth of connective tissue during the healing process. Recent research findings introduced the roles of reactive oxygen species (ROS) in the process of keloid formation. ROS induce oxidative stress and promote the activities of oxidative damage inducible genes. Aldo-keto reductase (AKR) prevents destructive ROS toxicity by detoxification of reactive carbonyl species. AKR1C3 is a stem detoxification enzyme from the AKR superfamily. This study aimed to compare the expression of AKR1C3 in normal and keloid skins in vivo.
Six specimens of normal skin from female patients who had breast reconstruction using a latissimus dorsi flap and six specimens of keloid tissues from patients who had a scar-related surgical operation. The obtained tissue specimens were frozen in liquid nitrogen immediately after the resection and kept at -80C. All tissues were used to evaluate the expression of AKR1C3 by conventional pathological confirmation using immunofluorescent staining of tissues and western blotting. Our team used the nonparametric Mann-Whitney test to compare statistical significance between the keloid and normal skin groups. If a P-value was less than 0.05, it was considered highly statistically significant.
By western blotting, it was confirmed that the amount of AKR1C3 protein was average of 1.92 (SD=0.083) in normal skin and 0.57 (SD=0.190) in keloid skin tissues. This indicates significant statistically lower AKR1C3 protein expression in keloid skin than normal skin tissues according to the Mann-Whitney U-test (P<0.05). Weak expression of AKR1C3 was also found in all six keloid tissues by immunofluorescent staining.
This study confirmed that the expression of AKR1C3 protein participates in ROS metabolism and plays a part in the downregulation of human keloid formation. To the best of our knowledge, this is the first work that reveals that AKR1C3 can affect the formation of keloid tissue.

국 문 요 약...........................................................................................1
본론
I. Introduction............................................................................................3
II. Materials and Methods.....................................................................4
A. Tissue Samples
B. Immunohistochemical staining
C. Western Blot Analysis
D. Stastical analysis
III. Result....................................................................................................6
A. Immunohistochemical examination
B. Western blot analysis
IV. Discussion...........................................................................................7
V. Conclusion..........................................................................................11
References...........................................................................................12
영 문 요 약.........................................................................................19

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