Resveratrol이 유방암세포의 Hippo-YAP에 의한 침윤 억제에 미치는 영향 : Resveratrol suppresses breast cancer cell invasion by inactivating a RhoA/YAP signaling axis :

김유나

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자료유형: 학위논문

저자정보: 김유나 (건양대학교 )

지도교수: 이회영

발행연도: 2017

저작권: 건양대학교 논문은 저작권에 의해 보호받습니다.

이용수5

이 논문의 연구 히스토리 (2)

2017

Resveratrol이 유방암세포의 Hippo-YAP에 의한 침윤 억제에 미치는 영향 : Resveratrol suppresses breast cancer cell invasion by inactivating a RhoA/YAP signaling axis

김유나 의학과 2017.01 학위논문

Resveratrol suppresses breast cancer cell invasion by inactivating a RhoA/YAP signaling axis

김유나 , 최소라 , 조경화 외 4명 Experimental and Molecular Medicine 2017.01 학술저널

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레스베라트롤 (Resveratrol) 은 식물과 같은 포도, 오디에서 발견된 항산화물지인 폴리페놀 (polyphenol) 계열에 속하는 물질로, 특히 적포도주에 다량 함유되어 있다. 레스베라트롤의 효능으로는 심장동맥 손상을 줄여주고 뇌졸중을 유발하는 현상인 혈액응고를 방지하는데 효과적이라고 알려져 있다. 하지만 레스베라트롤이 어떻게 유방암 세포의 침윤을 억제할 수 있는지에 대한 보고는 자세히 밝혀진 바가 없다. 따라서, 본 연구를 통하여 리소포스파티드산 (lysophosphatidic acid) 과 표피생장인자 (epithelial growth factor) 에 의해 유도된 유방암 세포 침윤을 레스베라트롤이 억제 할 수 있는지 확인하였다.
Hippo 신호 전달 경로는 세포의 크기를 조절하는 중요한 역할을 한다고 보고되고 있다. Hippo 신호 전달 경로에서 YAP (Yes-associated protein) 유전자는 세포의 증식과 사멸을 억제해 성장과정에 영향을 주는 것으로 알려져 있다. Hippo 신호가 작동하면 YAP 유전자가 불활성화되고, 반대로 Hippo 신호가 작동하지 않으면 YAP 유전자가 활성화된다. 활성화된 YAP 유전자는 세포 내로 진입해 세포의 증식을 촉진한다. 이러한 Hippo 신호 전달 경로는 암세포의 증식에도 관여할 수 있다.
리소포스파티드산과 표피생장인자를 처리 하기 전 레스베라트롤을 전 처리하였을 때, 레스베라트롤이 리소포스파티드산과 표피생장인자에 의해 유도된 유방암 세포의 침윤에 중요한 역할을 하는 Hippo 신호 전달의 하위 단계 인자 YAP의 유전자 발현을 감소시키는 것을 확인하였다. 또한 Hippo 신호 전달의 중요한 요소인 Lats 1 (Large tumor suppressor 1) 의 인산화 반응을 증가시키며, YAP유전자의 세포 내 진입 억제를 확인하였다. 그리고 레스베라트롤을 전 처리하였을 때, 암세포에서 과다 활성화되어 있는 것으로 알려진 RhoA (Ras homolog gene family) 의 발현을 억제함으로써 리소포스파티드산과 표피생장인자에 의해 유도된 유방암 세포의 침윤을 감소 시키는 것을 확인하였다. 또한, 지질 저하 악물로 알려진 심바스타틴 (Simvastatin)을 전 처리하였을 때, 피소포스파티드산에 의해 유도된 Last1과 YAP의 인산화 반응을 증가시키는 것을 확인하였다.
본 연구를 통해 확인한 레스베라트롤의 효과가 리소포스파티드산과 표피생장인자로부터 유도된 유방암의 진행 중 RhoA/Lats1/YAP의 발현 유도를 억제하게 된다는 새로운 역할을 규명하였고, 유방암을 치료하는 약물로 레스베라트롤과 심바스타틴을 병용함으로써 더 효과적인 항암효과를 기대할 수 있을 것이다.

#레스베라트롤 #항산화물질 #폴리페놀

I. INTRODUCTION 1
1.1. Hippo signaling pathway 4
1.2. Rho GTPases family 8
1.3. Resveratrol 13
1.4. Breast cancer 15
1.5. Purpose of the present study 19
II. MATERIALS AND METHODS
2.1. Reagents 20
2.2. Cell culture 20
2.3. Cell viability assay 20
2.4. Quantitative Real time-PCR 21
2.5. Immunoblotting 22
2.6. Immunoflourescence staining 26
2.7. In vitro invasion and migration assay 27
2.8. Plasmid DNA and siRNA transfection 28
2.9. Analysis of RhoA GTPase activity 28
2.10. RhoA GLISA activation assay 30
2.11. Statistics 33
III. RESULTS
3.1. REV reduces the expression of YAP target genes 34
3.2. REV inhibits LPA- and EGF-induced YAP activation 43
3.3. REV suppresses LPA- and EGF-induced breast cancer cell invasion 50
3.4. REV inactivates RhoA 59
IV. DISCUSSION 81
V. REFERENCE 84
VI. ABSTRACT 98

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