Lactobacillus acidophilus의 세포표층의 성상 - 세포벽외층의 규칙적 배열구조 단백질의 성상과 세포표면 소수성 -

정영건; 안장연

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자료유형: 학술저널

저자정보: 정영건 안장연

저널정보: 한국식품영양과학회 한국식품영양과학회지 한국영양식량학회지 제19권 제1호

발행연도: 1990.1

수록면: 94 - 106 (13page)

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사람이나 동물의 소화관의 상재균으로서 중요한 Lactobacillus acidophilus의 여러 균주를 사용하여 세포표면의 성상을 조사하였다. 분리한 세포벽의 negative 염색한 표본을 전자현미경으로 검토한 결과, 사용한 21주중 15주는 세포벽외층에 단백질로 구성된 regular array를 생산하고 있음을 알았다. RA를 구성하는 단백질의 분자량은 41KDa~48KDa이었다. 아미노산 조성 및 Staphylococcus aureus V8 protease로 한정분해 후 및 N-chlorosuccinimide로 부분절단후의 peptide map에서 Johnson등의 분류의 subgroup A-1에 속하는 균주가 생산하는 RA단백질은 불균질하였으나, 그외 균주의 RA단백질은 같은 subgroup에 속하고 있어도 불균질하였음을 알았다.
따라서 RA생산의 유무 및 RA단백질의 분자량측정과 peptide mapping을 행하면 지금까지 행해온 DNA-hybridization과 같은 복잡한 절차를 사용하지 않아도 subgroup A-1의 L. acidophilus가 동정 가능함을 알았다. L. acidophilus의 세포표면소수성은 일반적으로 RA를 생산하지 않는 균주보다는 RA를 생산하는 균주에 높은것이 많았다. RA생산균주에 있어서는 RA단백질은 세포표면소수성과 직접관계하고 있는것은 적었다.

Many strains of Lactobacillus acidophilus, which is one of the most important normal flora in the intestinal tract of human and animals, and has been used as a dietary adjunct for beneficial effect on the intestinal tract, were examined for the cell surface properties. Electron microscopy of negatively stained preparations of the isolated cell walls revealed that 15 out of 21 strains examined possessed a regularly arranged outer cell wall layer. All the L. acidophilus strains which produce regular arrays belonged to group A classified based on DNA-DNA homology by Johnson et al. (Int. J. Syst. Bacteriol. 30 ; 53~68, 1980) ; While the strains carrying no regular arrays fell under group B. The regular arrays were shown to be constructed from a single protein species with molecular weights ranging from 41 kDa to 48 kDa as analyzed by sodium dodecylsulfate polyacrylamide gel electrophoresis (SDS-PAGE) of the isolated cell walls.
All the regularly arranged proteins isolated from the strains of subgroup A-1 described by Johnson et al. gave the same amino acid composition and peptide pattern after limited proteolysis with Staphylococcus aureus V8 protease, and were resistant to cleavage with N-chlorosuccinimide. On the other hand, the regularly arranged proteins isolated from the strains of the other subgroup A gave quite different amino acid compositions and peptide patterns one another, if the strains were in the same subgroups. These results suggest that L. acidophilus strains can divide into group A and B by examining the presence or absence of regular arrays by electron microscopy or by detecting regularly arranged proteins by SDS-PAGE of the isolated cell walls. Furthermore, the strains of subgroup A-1 can be also identified by comparing peptide patterns of the regularly arranged proteins after limited proteolysis with S. aureus V8 protease. Cell surface hydrophobicity of the regular array-producing strains of L. acidophilus is generally higher than that of the strains carring no regular arrays. However, regularly arranged proteins seemed to have no relationship to the cell surface hydrophobicity in the most regular array-producing strains.

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