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어류 질병 치료를 위한 probiont의 개발에 목적을 두고 어병균 Vibrio anguillarum NCMB1의 생육에 저해물질을 생산하는 Bacillus amyloliquefaciens H41균주를 분리하고 이 물질의 특성을 규명하기 위하여 정제를 시행하였다. 분리 균을 배양한 배양 상등액을 70% 염석, 투석하여 조 효소액으로 제작하고 조 효소액을 DEAE-sephadex, A-50 ion exchange chromatography, sephadex G-200 gel filtration column chromatography을 통하여 정제하고 SDS-PAGE 를 통하여 단일밴드를 확인하고 최종 회수율 2.9%을 얻을 수 있었으며 40.8배의 정제된 V. anguillarum NCMB1 생육저해물질을 얻을 수 있었다. 정제된 저해물질은 저해정도에 따라 단위를 설정하여 활성을 측정하였으며, 분자량은 48 kDa 로 확인되었으며 정제물질의 활성을 위한 최적 반응 pH와 온도는 pH 7.5와 30℃로 확인되었다. 금속이온의 효과에 있어서는 CoCl₂, HgCl₂, ZnSO₄, AgNO₃에서는 완전히 저해되는 양상을 나타내었고 MgSO₄, MnSO₄에서 미미한 효소활성의 증가를 나타내었다. 그리고 염에 관한 안정성은 일반 해수의 농도인 3%의 농도에서도 활성을 나타내는 것으로 확인되었다. 정제된 저해물질을 현재 상업적으로 사용하고 있는 화학처리제나 항생제와 함께 효율성을 비교 해 보았을 때 저해물질은 약 78%의 저해 활성을 나타내는 것을 알 수 있었고 항생제보다는 효율성이 낮았으나 독성검사를 위해 정제물질을 살아있는 어류에 투여하였으나 어떤 해수어도 폐사하지 않는 것으로 보아 어류 자체엔 독성을 나타내지 않는 물질로 나타났다. 따라서 B. amyloliquefaciens H41 균주가 생산하는 정제 물질이 V. anguillarum 생육에 저해물질로 작용하는 것으로 밝혀졌으며 친환경적인 특성을 가진 물질로 밝혀졌다.
목차
서론
재료 및 방법
결과
고찰
요약
감사의 글
References
참고문헌 (14)
참고문헌 신청
1. [학술지(정기간행물)] - Allan, W. J. / 1998 / Isolation and characterization of turbot associated bacteria with inhibitory effects against Vibrio anguillarum / Appl. Environ. Microbiol 57 : 2223 ~ 2228
2. [학술지(정기간행물)] - Austin, B. / 1995 / A probiotic strain of Vibrio alginolyticus effective in reducing diseases caused by Aeromonas salmonicida, Vibrio anguillarum and Vibrio ordalli / J. Fish Dis 18 : 93 ~ 96
3. [학술지(정기간행물)] - Bly, J. E. / 1997 / Inhibition of Saprolegnia pathogenic for fish by Pseudomonas fluorescens / J. Fish Dis 20 : 35 ~ 40
4. [학술지(정기간행물)] - Gram, L. / 1999 / Inhibition of Vibrio anguillarum by Pseudomonas flourecence AH2, a possible probiotic treatment of fish / Appl. Environ. Micro 65 : 969 ~ 973
5. [학술지(정기간행물)] - Horne, M. T / 1983 / The adhesion of Vibrio anguillarum to host tissues and its role in pathogenesis / J. Fish Dis 6 : 461 ~ 471
2. [학술지(정기간행물)] - Austin, B. / 1995 / A probiotic strain of Vibrio alginolyticus effective in reducing diseases caused by Aeromonas salmonicida, Vibrio anguillarum and Vibrio ordalli / J. Fish Dis 18 : 93 ~ 96
3. [학술지(정기간행물)] - Bly, J. E. / 1997 / Inhibition of Saprolegnia pathogenic for fish by Pseudomonas fluorescens / J. Fish Dis 20 : 35 ~ 40
4. [학술지(정기간행물)] - Gram, L. / 1999 / Inhibition of Vibrio anguillarum by Pseudomonas flourecence AH2, a possible probiotic treatment of fish / Appl. Environ. Micro 65 : 969 ~ 973
5. [학술지(정기간행물)] - Horne, M. T / 1983 / The adhesion of Vibrio anguillarum to host tissues and its role in pathogenesis / J. Fish Dis 6 : 461 ~ 471
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