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인터루킨(IL)-12는 p35와 p40 단백질로 구성된 사이토카인으로, 선천면역과 적응면역을 서로 연결시켜주는 매우 중요한 면역학적 기능을 한다. p35 유전자는 지속적으로 발현되지만, p40 유전자의 발현은 외부자극에 의해 유도되는 점에 착안하여, 최근 IL-12 p40 유전자를 발현하는 세포를 형광 발현으로 동정할 수 있는 형광리포터생쥐 모델이 만들어졌다. 본 연구에서는 형광리포터 시스템을 이용하여 생체 내에 매우 적은 수로 존재하는 미세아교세포와 B 세포 소수 집단의 IL-12 p40 발현을 확인하고자 하였다.
먼저, IL-12 p40 형광리포터생쥐의 지라로부터 유래한 가지돌기세포와 복강으로부터 분리한 큰포식세포를 Toll-유사수용체(Toll-like receptor, TLR) 리간드로 자극한 후 IL-12 p40 발현 정도를 황색 형광단백질(yellow fluorescence protein, YFP) 발현으로 조사하였다. 그리고 뇌에 분포하는 큰포식세포의 한 종류인 미세아교세포를 신생 생쥐로부터 분리 증폭하여 IL-12 p40 발현을 조사하였다. 또한 지라의 B 세포에서 IL-12 발현이 유도되는지를 조사하였다.
지라 유래 가지돌기세포와 복강 유래 큰포식세포에서 IL-12 p40 형광리포터생쥐 시스템의 유용성을 확인하였다. 그리고 분리 증폭한 미세아교세포의 일부 세포가 TLR 리간드인 CpG oligodeoxynucleotides, lipopolysaccharide, peptidoglycan 그리고 polyinosinic-polycytidylic acid의 자극에 대해 IL-12 p40이 발현되는 것을 YFP 형광단백질 발현으로 확인할 수 있었다. 마지막으로 B 세포의 경우, B 세포의 소수 집단이 CpG 자극에 특이적으로 IL-12 p40을 발현하는 것을 확인하였다.
종합하면, 본 연구결과는 IL-12 p40 형광리포터생쥐 시스템을 통하여 뇌에 존재하는 미세아교세포의 일부와 소수의 B 세포집단에서 적절한 TLR 자극 시 IL-12 p40 유전자가 발현됨을 보였다. 이상의 결과는 IL-12 p40 형광리포터생쥐 시스템은 최근 새로이 발견되고 있는 소수 선천면역세포들을 효과적으로 동정하는 데 유용함을 제시한다.
먼저, IL-12 p40 형광리포터생쥐의 지라로부터 유래한 가지돌기세포와 복강으로부터 분리한 큰포식세포를 Toll-유사수용체(Toll-like receptor, TLR) 리간드로 자극한 후 IL-12 p40 발현 정도를 황색 형광단백질(yellow fluorescence protein, YFP) 발현으로 조사하였다. 그리고 뇌에 분포하는 큰포식세포의 한 종류인 미세아교세포를 신생 생쥐로부터 분리 증폭하여 IL-12 p40 발현을 조사하였다. 또한 지라의 B 세포에서 IL-12 발현이 유도되는지를 조사하였다.
지라 유래 가지돌기세포와 복강 유래 큰포식세포에서 IL-12 p40 형광리포터생쥐 시스템의 유용성을 확인하였다. 그리고 분리 증폭한 미세아교세포의 일부 세포가 TLR 리간드인 CpG oligodeoxynucleotides, lipopolysaccharide, peptidoglycan 그리고 polyinosinic-polycytidylic acid의 자극에 대해 IL-12 p40이 발현되는 것을 YFP 형광단백질 발현으로 확인할 수 있었다. 마지막으로 B 세포의 경우, B 세포의 소수 집단이 CpG 자극에 특이적으로 IL-12 p40을 발현하는 것을 확인하였다.
종합하면, 본 연구결과는 IL-12 p40 형광리포터생쥐 시스템을 통하여 뇌에 존재하는 미세아교세포의 일부와 소수의 B 세포집단에서 적절한 TLR 자극 시 IL-12 p40 유전자가 발현됨을 보였다. 이상의 결과는 IL-12 p40 형광리포터생쥐 시스템은 최근 새로이 발견되고 있는 소수 선천면역세포들을 효과적으로 동정하는 데 유용함을 제시한다.
목차
서론
재료 및 방법
결과
고찰
참고문헌
Abstract
참고문헌 (27)
참고문헌 신청
1. [학술지(정기간행물)] - Akira S / 2004 / Toll-like receptor signalling / Nat Rev Immunol 4 : 499 ~ 511
2. [학술지(정기간행물)] - Alexopoulou L / 2001 / Recognition of double-stranded RNA and activation of NF-kappaB by Toll-like receptor 3 / Nature 413 : 732 ~ 738
3. [학술지(정기간행물)] - Aloisi F / 1998 / Microglia are more efficient than astrocytes in antigen processing and in Th1 but not Th2 cell activation / J Immunol 160 : 4671 ~ 4680
4. [학술지(정기간행물)] - Aranami T / 2008 / Th17 Cells and autoimmune encephalomyelitis (EAE/MS) / Allergol Int 57 : 115 ~ 120
5. [학술지(정기간행물)] - Barr TA / 2007 / TLR-mediated stimulation of APC : Distinct cytokine responses of B cells and dendritic cells / Eur J Immunol 37 : 3040 ~ 3053
2. [학술지(정기간행물)] - Alexopoulou L / 2001 / Recognition of double-stranded RNA and activation of NF-kappaB by Toll-like receptor 3 / Nature 413 : 732 ~ 738
3. [학술지(정기간행물)] - Aloisi F / 1998 / Microglia are more efficient than astrocytes in antigen processing and in Th1 but not Th2 cell activation / J Immunol 160 : 4671 ~ 4680
4. [학술지(정기간행물)] - Aranami T / 2008 / Th17 Cells and autoimmune encephalomyelitis (EAE/MS) / Allergol Int 57 : 115 ~ 120
5. [학술지(정기간행물)] - Barr TA / 2007 / TLR-mediated stimulation of APC : Distinct cytokine responses of B cells and dendritic cells / Eur J Immunol 37 : 3040 ~ 3053
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