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저자정보
Maheshwor Thapa (덕성여자대학교) Jundong Yu (한국마사회) Wonjae Lee (조선대학교) Md. Fokhrul Islam (조선대학교) Hye-Ran Yoon (덕성여자대학교)
저널정보
한국분석과학회 분석과학 분석과학 제28권 제5호
발행연도
2015.10
수록면
323 - 330 (9page)

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알캅톤뇨증은 극히 드문 희귀 유전성 대사이상질환으로, 호모겐티세이트 디옥시게나제의 부족이나 결손으로 인한 질환이며 호모겐티식산 (HGA)의 축적을 특징으로 한다. 임상적으로는 호모겐티식산혈증, 관절염 및 퇴자병 (ochronosis) 등을 보인다. 본 연구는 고가이고 시간이 많이 걸리는 고체상 추출단계 없이 신속하게 우수한 감도로 혈장 중 HGA의 정량분석을 위해 개발되었다. 통합 혈장 중 100 μL를 취하여 에틸아세테이트로 액체-액체 추출(LLE)한 후, 트리메틸 실릴 유도체 (TMS) 화한 후 GC-MS로 정량하였다. 카르복실기 및 히드록실 관능기의 TMS 유도체화의 형성은 80 oC에서 5 분 동안 BSTFA(10% TMCS 포함)로 반응시켜 수행 하였다. GC-MS 의 선택 이온 모니터링을 위한 HGA의 선택 이온은 m/z=384, m/z= 341, m/z=25로 설정 하였다. 통합 혈장에 여러 농도로 표준품을 첨가하여 검토한 검량선은 1-100 ng/μL 범위에서 직선성은 R2=0.9991로 양호하게 나타났다. 통합 혈장에 HGA를 2, 20과 80ng/μL 농도를 첨가하여 회수율, 정확도와 정밀도를 측정하였을 때, 일간내 회수율은 99-125% 였고, 일간외 회수율은 95-115% 였고, 정확도는 1-15% 이내로 양호하였다. LOD와 LOQ는 각각 0.4 ng/μL, 4 ng/μL로 관찰되었다. 한국인 정상 혈장으로부터 HGA를 분석하였을 때, 적용된 모든 시료에서 HGA는 검출되지 않았다. 결론적으로 본 연구에서 개발된 분석 방법을 이용하면 알캅톤뇨증 환자를 신속하게 진단할 수 있으며 그 치료과정에서의 HGA 모니터링에 유용하게 응용할 수 있음을 시사한다.
#Homogentisic acid #Alkaptonuria #Inherited metabolic disease #Gas chromatography-mass spectrometry

목차

Abstract
요약
1. Introduction
2. Experimental Method
3. Results
4. Discussion
5. Conclusions
References

참고문헌 (14)

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[학술지(정기간행물)] - H. Z. Paul / 1976 / / Anal. Chem 48 : 2200 ~ 2202 google schola [학술지(정기간행물)] - R. A. Milch / 1960 / Studies of alcaptonuria: inheritance of 47 cases in eighty highly inter-related Dominican kinders / Am. J. Hum. Genet 12 : 76 ~ 85 google schola [학술지(정기간행물)] - S. Srsen / 1978 / Alkaptonuria in the Trencin District of Czechoslovakia / Am. J. Med Genet 2 : 159 ~ 166 google schola [학술지(정기간행물)] - M. A. Essa / 1998 / / Ann. Saudi Med 18 : 442 ~ 444 google schola [학술지(정기간행물)] - C. Phornphutkul / 2002 / / N. Engl. J. Med 347 : 2111 ~ 2121 google schola

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