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학술저널
저자정보
강태영 (경상대학교 수의과대학, 동물의학연구소) 채영진 (서울대학교 수의과대학) 이항 (서울대학교 수의과대학) 이경광 (한국과학기술연구원 유전공학연구소) 박충생 (경상대학교 농과대학) 이효종 (경상대학교 수의과대학, 동물의학연구소)
저널정보
한국동물번식학회 한국수정란이식학회지 한국수정란이식학회지 제13권 제2호
발행연도
1998.1
수록면
97 - 106 (10page)

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The pronuclear injection of metallothionein-human growth hormone (MT-hGH) gene into rabbit zygotes was performed to establish in vitro developmental system and to detect the presence of the injected gene by nested PCR. Mature female New Zealand White rabbits were superovulated by eGG and hCG treatments. The rabbits were mated and the zygotes were collected from the oviducts 18-22 h after hCG injection by flushing with D-PBS. Two to three picoliters of MT-hGH gene was microinjected into male pronuclei. The foreign gene-injected zygotes were cultured in TCM-199 or RD mediurn containing 10% FCS with a monolayer of rabbit oviductal epithelial cefls in a 5% $CO_2$ incubator. The presence of injected DNA in rabbit embryos or blastomeres at different developmental stages .vas detected by a nested PCR analysis. The results are summarized as follows ; 1.The developmental rate of the MT-hGH gene-injected zygotes to blastocyst was significantly higher in TCM-199 medium (68.1%) than in RD medium (42.9%). 2.The gene injection into pronuclei at 18 or 22 hours post hCG treatment during pronuclear stage did not much affect on the in vitro development of the rabbit embryos. 3.The rate of gene-positive embryos detected by the nested PCR analysis was significantly decreased when they developed to blastocysts. The results indicate that the screening of transgene in rabbit embryos by nested PCR analysis could be a prornisible method for the preselection of transgenic embryos. Furthermore, the preselection of transgenic embryos would greatly reduce hoth the cost and effort of production of transgenic animals.
#MT-hGH gene #PCR #transgene preselection #rabbit

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