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박창우 (한국표준과학연구원) 이진아 (한국표준과학연구원) Hassan Zohaib ul (Microbiological Analysis Team Biometrology Group Korea Research Institute of Standards and Science) 구근본 (한국화학연구원) 김성준 (한국화학연구원) 김홍기 (한국화학연구원) 박창균 (한국화학연구원) 박건수 (한국화학연구원) 박대의 (한국화학연구원부설 안전성평가연구소) 백승화 (한국화학연구원) 박동주 (한국표준과학연구원) 이지혜 (한국파스퇴르연구소) 전상은 (한국파스퇴르연구소) 김승택 (재단법인한국파스퇴르연구소) 이창섭 (전북대학교) 유희민 (한국표준과학연구원) 김세일 (한국표준과학연구원)
저널정보
한국미생물생명공학회 Journal of Microbiology and Biotechnology Journal of Microbiology and Biotechnology 제31권 제3호
발행연도
2021.1
수록면
358 - 367 (10page)

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The World Health Organization (WHO) has declared the coronavirus disease 2019 (COVID-19) as an international health emergency. Current diagnostic tests are based on the reverse transcriptionquantitative polymerase chain reaction (RT-qPCR) method, which is the gold standard test that involves the amplification of viral RNA. However, the RT-qPCR assay has limitations in terms of sensitivity and quantification. In this study, we tested both qPCR and droplet digital PCR (ddPCR) to detect low amounts of viral RNA. The cycle threshold (CT) of the viral RNA by RT-PCR significantly varied according to the sequences of the primer and probe sets with in vitro transcript (IVT) RNA or viral RNA as templates, whereas the copy number of the viral RNA by ddPCR was effectively quantified with IVT RNA, cultured viral RNA, and RNA from clinical samples. Furthermore, the clinical samples were assayed via both methods, and the sensitivity of the ddPCR was determined to be equal to or more than that of the RT-qPCR. However, the ddPCR assay is more suitable for determining the copy number of reference materials. These findings suggest that the qPCR assay with the ddPCR defined reference materials could be used as a highly sensitive and compatible diagnostic method for viral RNA detection.

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