벌꿀의 잔류 DNA에서 사탕수수 또는 사탕무 고유 유전자 검출을 위한 표준 유전자 검사법

윤철기; 김선미; 윤민희; 윤병수

doi:10.17519/apiculture.2021.09.36.3.207

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자료유형: 학술저널

저자정보: 윤철기 (한국꿀벌질병연구소) 김선미 (국립농업과학원) 윤민희 (진클론) 윤병수 (경기대학교)

저널정보: 한국양봉학회 Journal of Apiculture Journal of Apiculture Vol.36 No.3

발행연도: 2021.9

수록면: 207 - 220 (14page)

DOI: 10.17519/apiculture.2021.09.36.3.207

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천연벌꿀을 사양벌꿀과 판별하기 위하여, 벌꿀에서 분리한 잔류 유전자에 대한 사탕수수 특이 detection PCR 및 nested PCR을, 그리고 사탕무 특이 detection PCR 및 nested PCR 을 표준 검사법으로 정형화하고자 하였다.
이 표준 검사법은 먼저 벌꿀시료에서 잔류 DNA를 분리해 내고, 이 DNA시료를 initial template로 사용하여, 사탕수수 특이 detection PCR 그리고 사탕무 특이 detection PCR을 수행하는 것이다. 그리고 해당 PCR 산물을 1/10,000 희석하여, 이 희석액을 initial template로 사탕수수 특이 nested PCR과 사탕무 특이 nested PCR을 각기 수행하는 것이다.
수천 분자 이하의 특이 분자를 기질로 사용하였던 detection PCR (1차 PCR)은 해당 특이 분자를, 형광검출기가 인지할 수 없는 수준이나마, 증폭시키기는 하였기에, 그 1차 PCR 산물을 희석하여 초기기질로 사용한 Nested PCR (2차 PCR)은 해당 특이분자를 검출이 가능한 분자수로 쉽게 증폭시킬 수 있었다.
벌꿀에서 분리한 사탕수수 또는 사탕무 고유 유전자의 PCR 검출로 해당 당원을 사양한 사양벌꿀은 보다 명백히 판정될 수 있을 것이며, 이 유전자 검사에 필요한 모든 물질과 시약, 그리고 세부 실험방법들을 8개 벌꿀에 대한 실험 예와 함께 적시하였다. 제안하는 실험법이 벌꿀의 잔류 유전자 분석의 표준 실험법으로, 국내 사양꿀 판별의 기본 실험법으로 널리 활용되기를 기대한다.

#Honey #Residual DNA #sugar-cane #sugar-beet #Ultra-rapid PCR #Nested PCR

참고문헌 (16)

참고문헌 신청

Baksay, S. / 2020 / Experimental quantification of pollen with DNA metabarcoding using ITS1 and trnL / Sci. Rep 10:4202

Bell, K. L. / 2016 / Pollen DNA barcoding:current applications and future prospects / Genome 59:629~640

de Vere, N. / 2017 / Using DAN metabarcoding to investigate honey bee foraging reveals limited flower use despite high floral availability / Sci. Rep 7:42838

김병희 / 2018 / 사탕수수 설탕 및 사양꿀에서 사탕수수(Saccharum officinarum) 고유 유전자의 검출 / Journal of Apiculture 33(3):221~226

Kim, B. H. / 2019 / Detection of chronic bee paralysis virus using ultra-rapid PCR and nested ultra-rapid PCR / J. Apic. Res 58(1):133~140

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