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논문 기본 정보

자료유형
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저자정보
저널정보
한국미생물생명공학회 Journal of Microbiology and Biotechnology Journal of Microbiology and Biotechnology 제25권 제12호
발행연도
2015.1
수록면
2,082 - 2,089 (8page)

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Avian beta-defensin 9 (AvBD9) is a small cationic peptide consisting of 41 amino acids that plays a crucial rule in innate immunity and acquired immunity in chickens. Owing to its wide antibacterial spectrum, lack of a residue, and failure to induce bacterial drug resistance, AvBD9 is expected to become a substitute for conventional antibiotics in the livestock and poultry industries. Using the preferred codon of Pichia pastoris, the mature AvBD9 peptide was designed and synthesized, based on the sequence from GenBank. The P. pastoris constitutive expression vector pGHKα was used to construct a pGHKα-AvBD9 recombinant plasmid. Restriction enzyme digestion was performed using SacI and BglII to remove the ampicillin resistance gene, and the plasmid was electrotransformed into P. pastoris GS115. High-expression strains with G418 resistance were screened, and the culture supernatant was analyzed by Tricine-SDS-PAGE and western blot assay to identify target bands of about 6 kDa. A concentrate of the supernatant containing AvBD9 was used for determination of antimicrobial activity. The supernatant concentrate was effective against Escherichia coli, Salmonella paratyphi, Salmonella pullorum, Pseudomonas aeruginosa, Enterococcus faecalis, and Enterobacter cloacae. The fermentation product of P. pastoris carrying the recombinant AvBD9 plasmid was adjusted to 1.0 × 108 CFU/ml and added to the drinking water of white feather broilers at different concentrations. The daily average weight gain and immune organ indices in broilers older than 7 days were significantly improved by the AvBD9 treatment.
#AvBD9 #Pichia pastoris #constitutive expression #antibacterial activity #white feather broiler #productivity

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Gustafsson C / 2004 / Codon bias and heterologous protein expression / Trends Biotechnol 22 : 346 ~ 353 google schola Kloster M / 2008 / SCUMBLE: a method for systematic and accurate detection of codon usage bias by maximum likelihood estimation / Nucleic Acids Res 36 : 3819 ~ 3827 google schola Li MH / 2012 / Heterologous expression of chicken beta-defensin-7 in Escherichia coli and antimicrobial activity analysis / Microbiol. China 12 : 1778 ~ 1786 google schola Lynn DJ / 2004 / Bioinformatic discovery and initial characterisation of nine novel antimicrobial peptide genes in the chicken / Immunogenetics 56 : 170 ~ 177 google schola Shan YJ / 2012 / Codon optimization and its expression of chicken β-defensin-1 gene in eukaryocyte / J. Yunnan Agric. Univ 27 : 833 ~ 839 google schola

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