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세포막 단백질의 topology는 막단백질의 중요한 특징이다. 우리는 이전에 C4orf32단백질을 클로닝 하였으나, 이 단백질의 세포내 위치나 topology는 알지 못했다. 이번 연구를 통해 C4orf32는 세포내에서 소포체에 위치되는 막단백질임을 알게 되었다. C4orf32의 topology를 알기 위해 protease protection assay, fluorescence protease protection (FPP) assay, FRB/rapamycin/FKBP system을 활용하였다. Protease protection assay와 FPP assay를 적용한 결과 C-말단에 GFP를 붙인 C4orf32-GFP의 경우 GFP가 소포체의 세포질 표면에 위치함을 확인할 수 있었다. 또한, FRB/rapamycin/FKBP시스템을 이용한 실험에서 rapamycin이 처리되지 않은 경우는 mRFP-FKBP가 세포질에 위치하다가 rapamycin이 처리되면 C4orf32-GFP-FR가 위치하는 소포체로 이동함을 확인할 수 있었다. 이러한 사실은 C4orf32의 C-말단이 소포체의 세포질쪽 면에 위치한다는 사실을 말해준다. 이러한 연구를 통해 C4orf32는 Type I 소포체 막단백질에 속한다는 사실을 확인할 수 있었다.
목차
Introduction
Material and Methods
Results and Discussion
References
초록
참고문헌 (11)
참고문헌 신청
Dempski, R. E. Jr. and Imperiali, B. 2002. Oligosaccharyl transferase: gatekeeper to the secretory pathway. Curr. Opin. Chem. Biol. 6, 844-850
Jun, M. H., Jun, Y. W., Kim, K. H., Lee, J. A. and Jang, D. J. 2014. Characterization of the cellular localization of C4orf34 as a novel endoplasmic reticulum resident protein. BMB Reports 47, 563-568.
Jun, Y. W., Park, H., Lee, Y. K., Kaang, B. K., Lee, J. A. and Jang, D. J. 2016. D-AKAP1a is a signal-anchored protein in the mitochondrial outer membrane. FEBS Lett. 590, 954- 961
Lee, H. and Kim, H. 2014. Membrane topology of transmembrane proteins: determinants and experimental tools. Biochem. Biophys. Res. Commun. 453, 268-276
Lee, H., Lara, P., Ostuni, A., Presto, J., Johansson, J., Nilsson, I. and Kim, H. 2014. Live-cell topology assessment of URG7, MRP6102 and SP-C using glycosylatable green fluorescent protein in mammalian cells. Biochem. Biophys. Res. Commun. 450, 1587-1592
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